拿到手一個新的
賽默飛離子色譜柱,我們首先就要做一下這個色譜柱的柱效。關(guān)于柱效的很多人并不明白,主要有以下幾個方面的問題,下面我們?yōu)榇蠹易鱿潞唵谓獯稹?br /> 一、什么是賽默飛離子色譜柱的柱效?
二、柱效下降會有什么現(xiàn)象?
三、柱效下降后如何來提高柱效。
1、什么是柱效?
柱效是指色譜柱保留某一化合物而不使其擴散的能力。柱效能是一支色譜柱得到窄譜帶和改善分離的相對能力。
柱效,從名字上理解是色譜柱的分離效果。色譜柱的有效塔板數(shù)越大或有效的塔板高度越低,色譜柱的柱效越好,類似于每個塔板的分離效率相同,有效塔板數(shù)越多,終得到的質(zhì)越純。
柱效率是指溶質(zhì)通過色譜柱之后其區(qū)域?qū)挾仍黾恿硕嗌?,它與溶質(zhì)在兩相中的擴散及傳質(zhì)情況有關(guān),這是所謂色譜的動力學(xué)過程。
2、
賽默飛離子色譜柱的柱效下降會有什么現(xiàn)象?
1.看峰分離度,分離度直接關(guān)系測試結(jié)果準確性,可以判斷柱效是否下降,柱效下降分離度一般會變差。
2.測定色譜柱的塔板數(shù)來判斷
3.通過壓力變化和出峰時間來判斷,一般柱效下降時伴隨著柱壓的升高和降低,此時出峰的時間也會和之前有很大差異。
4.還可以根據(jù)新的柱子的保留時間判斷,看重復(fù)性,平行性如何.
5.通過譜圖峰型的變化,是否有嚴重前伸和拖尾現(xiàn)象,如果峰型很差了,柱效已經(jīng)下降了
3、賽默飛離子色譜柱的柱效下降后如何來提高柱效。
賽默飛離子色譜柱長時間在緩沖溶液中使用和進樣,將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力下降,.用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生.另外,還可以選擇能溶解柱內(nèi)污染物的溶劑為流動相做正方向和反方向沖洗.但再生后的色譜柱柱效是不可能恢復(fù)到新柱的水平的.如果柱子裝反了,可以調(diào)回來,但可能會造成柱內(nèi)擔體塌陷.在不得已的情況下盡量不要反裝色譜柱。